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国疾控传防发〔2023〕16号激情综合网
对于印发猴痘防控决议的呈报
各省、自治区、直辖市及新疆分娩建造兵团疾控局、卫生健康委:
为进一步作念好猴痘防控使命,实时灵验卤莽猴痘疫情,提高猴痘防控使命的科学性、精确性和灵验性,切实选藏东说念主民群众生命安全和体格健康,国度疾控局会同国度卫生健康委制定了《猴痘防控决议》。现印发给你们,请老成组织实施。
国度疾控局
国度卫生健康委
2023年7月26日
(信息公开形势:主动公开)
猴痘防控决议
猴痘是由猴痘病毒(Mpox virus,MPXV)感染所致的一种东说念主兽共患病。2022年9月,我国讲述首例猴痘输入病例。2023年6月以来,我国多个省份先后讲述多例猴痘病例,激励新增原土续发疫情和归隐传播的风险较高。为指导各地科学精确作念好猴痘防控使命,切实选藏东说念主民群众体格健康,制定本决议。
一、总体要求
对持“驻防为主、防治取悦、精确防控、快速惩处”原则,落实“早发现、早讲述、早圮绝、早赞助”措施。开展医疗机构、重心东说念主群、入境东说念主员和重心风物等多渠说念监测。加强疫情分析与风险研判,有针对性地开展重心东说念主群健康素养和详尽搅扰。落实病例圮绝赞助、流行病学走访和密切战斗者跟踪连接等措施。对持发现一说念、放浪一说念,实时阻断疫情传播。
二、疾病特征
(一)病原学特征。
猴痘病毒属于痘病毒科正痘病毒属,为基因组全长约197kb的双链DNA病毒。1958年头度在山公中发现该病毒。1970年在刚果民主共和国又名疑似天花患者的标本中初度分离到猴痘病毒,为首例确诊的东说念主类猴痘病例。
猴痘病毒分为两个进化分支:(1)分支I,曾称为中非分支或刚果盆地分支;(2)分支II,曾称为西非分支,进一步分为IIa和IIb分支。其中激励2022年全球非场地性流行区猴痘暴发疫情的毒株为IIb分支。IIb分支刻下已出现较多亚分支,包括A.1、A.2和B.1等亚分支,2022年9月我国讲述首例输入性猴痘病例以来,各地报送中国疾控中心病毒病所的毒株序列均属于IIb分支。
猴痘病毒耐干燥和低温,在结痂、泥土和衣物、床上用品等物体名义可生计数月。该病毒对热敏锐,加热至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%酒精、含氯消毒剂、过氧乙酸等常用消毒剂及紫外线可灵验灭活病毒,对过氧化氢、次氯酸钠、戊二醛、邻苯二甲醛等敏锐。
(二)流行病学特征。
1.传染源。猴痘病毒的宿主尚不解确,刻下以为非洲啮齿类动物(非洲松鼠、树松鼠、冈比亚袋鼠、睡鼠等)可能为其当然宿主。传染源包括猴痘病例及感染的啮齿类动物、猴和猿等灵长类动物。
2.传播道路。猴痘病毒主要经黏膜和碎裂皮肤侵入东说念主体,主要通过径直战斗病例的病变皮肤或黏膜传播,亦可通过战斗被病毒沾污的物品、万古间近距离吸入病例呼吸说念飞沫传播,战斗感染动物的呼吸说念分泌物、病变渗出物、血液相称它体液,或被感染动物咬伤、抓伤感染传播。
3.易感东说念主群。东说念主群深广易感。接种过天花疫苗对猴痘病毒存在一定进程的交叉保护力。
4.疫情特征。2021年昔时的猴痘疫情主要在中非和西非地区呈场地性流行,主要通过战斗感染动物传播,所激励的东说念主传东说念主疫情传播链较短,主要为儿童及青丁壮的荒疏病例及集会性疫情,通过家庭或旅行方式偶尔播散至其他国度和地区。2022年5月以来全球多国暴发的疫情主要在男男性步履东说念主群(Men who have sex with men,简称MSM,指与同性发素性步履的男性)中经性战斗传播,大部分病例为青丁壮男性,通过大型约会以及后续在社区的MSM扩散,并传播至全球多个国度和地区。
(三)临床特征。
1.遮挡期:5-21天,多为6-13天。
2.传染期:病例出现症状后至皮疹结痂当然零碎并形成新皮肤前具有传染性。有走访领导一些病例可能在出现症状前1-4天存在传染性。
3.早期症状:可出现发烧、头痛、背痛、肌痛和淋谄媚肿大等。
4.皮疹和黏膜疹:平庸在热退后出现,有些病例可出当今全身症状之前。皮疹发生常经过斑疹、丘疹、水疱、脓疱、结痂至结痂零碎几个阶段,不同形态皮疹可同期存在,可伴有赫然痒感和痛苦。可累及口腔咽喉黏膜、肛门、生殖器、结膜和角膜等。结痂零碎后可留传红斑或色素千里着致使瘢痕,瘢痕持续时代可长达数年。
5.病程及严重进程。猴痘病程约2—4周,免疫力低下患者的病程可能较长。猴痘为自限性疾病,大多数病例症状会自行消失,也有重症和死亡发生,主要为儿童、妊妇和免疫力低下东说念主群。
2022年以来全球多国猴痘暴发疫情中,大多数病例临床推崇较轻,部分病例无全身症状,皮疹仅限于生殖器、肛门直肠黏膜部位,死亡病例主要为未得到赞助的艾滋病病毒感染者等免疫力低下东说念主群。2022年以来全球非场地性流行区病例的病死率约为0.1%。
三、宣传素养与搅扰
针对重心东说念主群、进出境东说念主员和一般东说念主群等不同东说念主群分类开展宣传素养,有针对性地加强不同东说念主群的自我防范意志和个东说念主防护措施,积极配合作念好防控使命。
(一)重心东说念主群。各地卫生健康与疾控部门衔接联系社会组织,充分鉴戒艾滋病防治详尽搅扰训诲和就业模式,在MSM频繁进出的酒吧、会所、浴池等重心举止风物,开展同伴素养。借助各人媒体、MSM酬酢网站等互联网平台,开展猴痘防控学问宣传素养,提高重心东说念主群防范意志,减少高危步履,教导有可疑战斗史者自觉作念好自我健康监测,增强主动就诊意志。
重心东说念主群宣传搅扰要求详见附件1《重心东说念主群宣传搅扰指南》。
(二)进出境东说念主员。通过披发宣传贵府等形势,加强进出境东说念主员猴痘防控学问宣传素养。提醒出境东说念主员关注释标地国度和地区猴痘疫情信息,不战斗猴痘样症状者及啮齿类、灵长类等动物。提醒来自猴痘疫情讲述国度和地区的东说念主员,如在境外有可疑战斗史,入境后21天内应作念好自我健康监测,幸免与他东说念主发生密切战斗,一朝出现发烧、皮疹、淋谄媚肿大等猴痘样症状,应主动就诊并真确讲述流行病学史。
(三)一般东说念主群。各地充分阐述新媒体以及播送、电视、报纸等传统媒体作用,开展猴痘防控学问宣传素养,提高公众科学防范意志。
四、疫情监测和讲述
(一)监测病例界说。
1.猴痘样症状者。不解原因急性皮疹(面部或口腔黏膜、行为、生殖器或会阴、肛周等部位),伴发烧(>37.3℃)或淋谄媚肿大者。
2.疑似病例。猴痘样症状者,发病前21天内具备以卑劣行病学史中的任何一项:(1)有猴痘病例讲述地区旅居史;(2)有猴痘确诊病例或疑似病例战斗史;(3)有同性性步履,或性伴有同性性步履史;(4)有场地性流行区可疑动物战斗史。
3.确诊病例。猴痘样症状者、疑似病例及密切战斗者,经实验室检测猴痘病毒核酸阳性或病毒分离阳性者。
(二)多渠说念监测。
1.医疗机构监测。各级各种医疗机构要开展猴痘样症状监测,尤其是皮肤(性病)科、肛肠科、艾滋病自发顾问检测门诊等要重心关注猴痘样症状者。发现猴痘样症状者,应主动商榷流行病学史,纪录患者现住址及接头方式,采集标本送疾控机构进行猴痘核酸检测。具备猴痘病毒检测能力及猴痘病毒实验举止天禀的医疗机构也可开展检测。
2.重心东说念主群监测。各级各种医疗机构、疾控机构在对MSM等重心东说念主群开展诊疗或检测顾问就业时,应主动商榷是否有猴痘样症状相称可疑战斗史。如发现猴痘样症状者和疑似病例,应实时采集标本进行猴痘病毒核酸检测。
3.入境东说念主员监测。海关收到猴痘联系颠倒健康申报或检疫发现存猴痘样症状的入境东说念主员,应实时进行标本采集和核酸检测,并披发《就诊圣洁卡》,要求其尽快就诊;对于核酸检测阳性者,将联系信息通报辖区疾控机构,由联系部门进一步走访惩处。
4.重心风物浑水监测。有条目的地区可凭证当地疫情局势,经评估对MSM频繁进出的酒吧、会所、浴池等重心举止风物开展浑水监测。
(三)病例讲述。
联系医疗机构凭证临床推崇、流行病学和实验室检测效用,实时对患者进行会诊。
会诊的疑似病例和确诊病例应于24小时内通过中国疾病驻防放浪信息系统的监测讲述连接模块进行积累直报。如为境外输入病例需填写输入开端国度或地区。不具备积累直报条目的医疗卫盼望构,需在规定时限内将传染病讲述卡信息讲述属地州里卫生院、社区卫生就业中心或县级疾控机构进行积累讲述,同期传真或寄送传染病讲述卡至代报单元。负责病例积累直报的医疗卫盼望构,要凭阐述验室检测效用、流调进展实时对病例信息进行复核、矫正。
各县(市、区)出现首例猴痘确诊病例或者2例及以上存在流行病学关联实在诊病例,应当在2小时内通过突发各人卫滋事件讲述连接信息系统讲述,事件级别选拔“未分级”。
五、疫情惩处
(一)病例连接。
各地发现猴痘疑似病例和确诊病例应当实时转运至医疗机构进行圮绝赞助,如临床症状赫然好转,病变部位已结痂,可转为居家圮绝赞助,直至皮疹结痂当然零碎,消灭居家圮绝。对病情较轻且具备居家圮绝赞助条目实在诊病例,经医疗机构与疾控机构衔接评估后,可径直遴选居家圮绝赞助。对于实行居家圮绝赞助实在诊病例披发《猴痘病例居家圮绝赞助健康呈报书》(见附件2)。确诊病例居家圮绝赞助期间,单东说念主单间居住,幸免与家东说念主有皮肤或黏膜径直战斗,作念好被沾秽物品的消毒,非必要不过出,确须出门时穿长衣长裤、率领医用外科口罩,幸免赶赴东说念主群集会风物,幸免与其他东说念主有皮肤或黏膜径直战斗;指定医疗机构安排专东说念主负责上门或电话随访,提供健康顾问和医疗指导。
(二)流行病学走访。
县(市、区)级疾控机构接到辖区疑似病例和确诊病例讲述后,实时组织开展流行病学走访,查找感染开端,掌捏、跟踪和连接密切战斗者,分析传播链及传播特征,实时发现潜在的风险东说念主群相称界限、特征,有针对性地开展宣传素养和详尽搅扰。走访过程中阐述多部门联防联控的协同作用,尽可能获取全面准确的流调信息。
走访内容主要包括病例基本信息、发病就诊情况、临床推崇、转归及实验室检测;发病前21天内与可疑感染开端的战斗史、战斗风物及战斗方式;发病后至圮绝赞助前的具体举止地点、与其有皮肤或黏膜径直战斗者,以及发病前4天内与其有性战斗者。
猴痘疫情流行病学走访要求详见附件3《猴痘疫情流行病学走访指南》。
(三)密切战斗者的判定和连接。
1.密切战斗者界说。径直战斗病例的病变部位相称被沾秽物品,或感染动物相称分泌物、渗出物等沾秽物;以及事业表示或万古间近距离吸入病例呼吸说念飞沫等,经评估有感染风险的东说念主员。
2.密切战斗者判定。凭证流行病学走访及表示风险评估效用,疾控机构负责实时对密切战斗者进行判定。
3.密切战斗者连接。疾控机构或下层医疗卫盼望构指导密切战斗者作念好自我健康监测,健康监测期限为最后密切战斗之日起21天。
密切战斗者自我健康监测期间可平淡生活与使命,需幸免与他东说念主发素性战斗等密切战斗,幸免捐献血液等;对持每天作念好体温测量和症状监测,出现猴痘样症状应实时就诊并主动讲述可疑战斗史。辖区疾控机构或下层医疗卫盼望构应在密切战斗者自我健康监测第7、14、21天上门或电话对其进行随访,提供顾问指导,发现颠倒情况实时进行惩处。
密切战斗者判定连接要求详见附件4《猴痘密切战斗者判定和连接指南》。
(四)消毒与东说念主员防护。
作念好病例衣物、毛巾、床单、餐具等个东说念主用品,以及可能被病例分泌物、渗出物、体液等沾污的环境和物体名义的消毒。从事病例诊治顾问、流行病学走访、环境清洁消毒、标本采集和实验室检测等使命主说念主员在使命期间作念好个东说念主防护。
消毒与东说念主员防护要求详见附件5《猴痘消毒手艺指南》和附件6《猴痘个东说念主防护指南》。
六、实验室检测
猴痘病毒核酸检测首选皮肤或黏膜病变部位标本,可同期采集口咽拭子标本。各省首例猴痘确诊病例标本应送中国疾控中心病毒病所进行复核;原土疫情中的首发或早期确诊病例、与早期病例有流行病学关联的要津确诊病例、感染开端不解的原土确诊病例、境外输入确诊病例阳性标本等,荧光定量PCR检测Ct值≤32时进行病毒基因测序。扫数测序原始数据、拼装序列及测序样本送检单应在获取序列48小时内报送中国疾控中心病毒病所进行汇总、分析。以上确诊病例应至少采集一套标本(包括核酸检测阳性者的皮肤或黏膜病变标本、口咽拭子标本以及发病急性期和复原期双份血清)送中国疾控中心病毒病所。
实验室检测具体要求详见附件7《猴痘病毒实验室检测手艺指南》。
七、院内感染放浪
医疗机构应当严格作念好院内感染放浪。疑似病例和确诊病例应安置在圮绝病房,疑似病例单间圮绝。医务东说念主员实践圭臬驻防,遴选经战斗传播和经飞沫传播疾病的圮绝与驻防措施,率领一次性乳胶手套、KN95/N95及以上司别的口罩、防护面屏或护目镜、一次性圮绝衣等,同期作念好手卫生。严格按照《医疗机构消毒手艺模范》对病例的体液、血液、排泄物、分泌物等进行模范处理,作念好诊疗环境(空气、物体名义、大地等)、医疗器械、病例使用物品等的清洁消毒。凭证《医疗废料连接条例》《医疗卫盼望构医疗废料连接见地》作念好医疗废料的惩处和连接。
八、使命要求
(一)加强组织融合。各地卫生健康、疾控部门加强与海关等关联部门的密切相助和信息分享,实时发现与惩处猴痘疫情,落实猴痘病例发现、疫情讲述、诊疗圮绝、密切战斗者跟踪连接等使命,防护疫情扩散和彭胀。各地在猴痘疫情防控过程中应留心保护病例、密切战斗者和重心东说念主群等个东说念主秘籍。
(二)加强宣传教导。各地要实时发布辖区猴痘疫情联系信息,作念好计谋解读和公众健康领导。通过多种方式和渠说念开展猴痘防控学问宣传,加强重心东说念主群宣传素养的针对性和实效性。实时回复社会花样,教导公众科学结实猴痘。
(三)加强东说念主员培训。各地要加强对各级疾控机构和医疗机构专科东说念主员的培训。对医务东说念主员重心开展猴痘病例的识别与会诊、病例发现与讲述、病例连接等联系学问培训,强化诊治意志。对疾控东说念主员重心开展流行病学走访、密切战斗者的判定和连接、实验室检测、重心东说念主群宣传搅扰等联系学问培训,提高猴痘疫情防控和救急惩处能力。
附件:
1.重心东说念主群宣传搅扰指南
2.猴痘病例居家圮绝赞助健康呈报书
3.猴痘疫情流行病学走访指南
4.猴痘密切战斗者判定和连接指南
5.猴痘消毒手艺指南
6.猴痘个东说念主防护指南
7.猴痘病毒实验室检测手艺指南
附件1
重心东说念主群宣传搅扰指南
2022年5月以来,全球非场地性流行区发生的猴痘疫情以男男性步履东说念主群(MSM)为主。为充分利用我国艾滋病防治详尽搅扰就业体系,开展MSM等重心东说念主群宣传搅扰,防范猴痘疫情传播扩散,形成常态化艾滋病与猴痘详尽防控一体化卤莽机制,制定本指南。
一、实施策略
在现存艾滋病防治详尽搅扰就业体系基础上,详尽应用步履学搅扰方法和技巧,通过宣传素养、促进安全性步履、动员检测、外展就业、同伴素养和互联网搅扰等,从个体、群体和社会等多个层面为方针东说念主群提供猴痘详尽搅扰就业。
二、组织实施
各级医疗机构和疾控机构要加强重心科室和艾滋病自发顾问检测门诊使命主说念主员猴痘学问培训,对重心东说念主群提供猴痘防控学问宣传、检测顾问与动员、赞助和关怀等就业。各级疾控机构应当积极鼓吹当地有能力、具有邃密艾滋病防治训诲的MSM志愿者或社会组织共同参与猴痘防治宣传使命,在使命过程中留心保护重心东说念主群个东说念主秘籍。
三、局势分析
各地要加强对重心东说念主群猴痘疫情、防控近况、影响因素及进出境情况的走访,及期间析研判猴痘疫情局势,为制定土产货高危步履搅扰使命计较提供依据。具体内容包括:1.重心东说念主群基数、举止形势和特色、举止风物、进出境的时代及地区等;2.猴痘学问、魄力和高危步履;3.猴痘疫情水平相称影响因素;4.猴痘防治计谋及专科机构已开展的使命;5.包括志愿者在内的关联组织和个东说念主已开展的搅扰举止;6.影响猴痘防治使命的贫困和问题。
四、宣传搅扰
(一)宣传素养。各级疾控机构或健康素养专科机构提供手艺守旧,社会组织参与,共同计议制定得当当地特色的猴痘驻防宣传材料,加强警示宣传素养。通过各人媒体、MSM网站和以移动末端为载体的交友软件等平台,宣传外洋、国内及土产货猴痘疫情信息和防控学问,提高重心东说念主群猴痘防范意志。
(二)同伴素养。各级疾控机构要加强同伴素养员挑选、招募和培训,组织和守旧同伴宣传举止,增强东说念主群猴痘风险防范意志,鼓吹主动检测。按时组织同伴素养职使命例会,了解猴痘搅扰使命存在的贫困和问题,有针对性地给以匡助和守旧。
(三)外展就业。各级疾控机构搅扰使命主说念主员按时到重心东说念主群举止风物开展猴痘宣传、顾问、披发宣传材料等外展就业举止,提高重心东说念主群猴痘防范意志和学问水平,鼓吹重心东说念主群加强自我健康连接,主动寻求检测顾问就业。
(四)检测顾问。各级疾控机构通过互联网、同伴素养、外展举止等多种形势动员有猴痘样症状或可疑战斗史的重心东说念主群进行猴痘检测。各级各种医疗机构皮肤(性病)科、肛肠科、艾滋病自发顾问检测门诊发现猴痘样症状者,应主动商榷其流行病学史及性战斗史,纪录患者现住址及接头方式,采集标本送疾控机构进行猴痘核酸检测,具备猴痘检测能力及猴痘病毒实验举止天禀的医疗机构也可开展检测。对于已建立互联网+HIV检测平台的地区,可增多猴痘检测内容,竣事互联网在线检测预约和效用查询。
五、重心风物搅扰
重心举止风物包括实体和编造两类风物,实体风物包括酒吧、会所、浴池等策动性风物,编造风物包括移动互联网和酬酢媒体。
(一)实体风物搅扰。
各级疾控机构负责组织搅扰使命主说念主员在当地MSM频繁进出的酒吧、会所、浴池等举止风物,开展猴痘驻防搅扰宣传,主要包括:
1.在MSM频繁进出的酒吧、会所、浴池等实体风物,张贴注释标健康素养宣传图片,成就健康素养贵府公告栏;
2.强化个东说念主健康包袱意志,开展猴痘健康顾问,鼓吹开展自我风险评估;
3.提供转介就业信息,呈报明确的诊疗历程以及联系检测、医疗机构称号、接头东说念主等信息。
各地要加强对猴痘确诊病例发病前21天内举止过的场是以及浑水监测阳性风物的搅扰宣传,怜爱方针东说念主群的个东说念主秘籍保护,加强对社会组织同伴素养员猴痘防治学问培训,建立模范的步履搅扰历程,提高自我防护技能。
(二)编造风物搅扰。
各级疾控机构负责组织指导当地有序开展猴痘线上宣传,在联系网站、酬酢媒体平台实时发布和更新猴痘宣传素养内容,形成面向重心东说念主群的猴痘检测-顾问-诊疗的线上宣传搅扰就业体系。
各级疾控机构守旧社会组织或同伴素养员利用网站、信箱或酬酢媒体平台,组织开展在线顾问和调换。实时解答网友提议的各式猴痘联系问题。针对不同期期猴痘传播特色,按时或不按时组织众人、专科东说念主员、同伴素养员利用互联网和酬酢媒体平台进行在线宣道。各级疾控机构要按时指导更新联系专科信息,确保宣传内容科学、灵验。
附件2
附件3
猴痘疫情流行病学走访指南
为指导各地疾控机构模范开展猴痘疑似病例、确诊病例和集会性疫情的流行病学走访,实时掌捏病例表示史、战斗史等流行病学联系信息,落实密切战斗者的跟踪判定,防护疫情传播扩散,制定本指南。
一、走访目标
(一)查找感染开端,掌捏、跟踪和连接密切战斗者。
(二)分析传播链及传播特征。
(三)实时发现潜在的风险东说念主群相称特征、界限,有针对性地开展宣传素养和详尽搅扰。
二、走访对象
疑似病例、确诊病例和集会性疫情。
三、走访方法和内容
通过查阅贵府,商榷病例、诊治大夫、家属和知情东说念主等进行流行病学走访。如病例的病情允许,走访时应先走访病例本东说念主,再对其诊治大夫、家属和知情者进行走访。
开展个案走访时,要老成、详备了解和纪录病例基本信息、发病就诊情况、临床推崇、转归及实验室检测信息;发病前21天内与可疑感染开端的战斗史、战斗风物及战斗方式;发病后至圮绝赞助前的具体举止地点、与其有皮肤或黏膜径直战斗者,以及发病前4天内与其有性战斗者。
(一)基本情况。如姓名、性别、年岁、住址、国籍、接头方式等。
(二)发病就诊情况。临床推崇、实验室检测、发病就诊经过和病情变化与转归。
(三)感染开端走访。对病例发病前21天内的表示史开展走访,包括境表里猴痘病例讲述地区旅行史或居住史,对可疑的感染开端要详备商榷战斗时代、方式、频次、地点及战斗时遴选的防护措施等,终点是性战斗史。走访时,若发现走访表中未列入,但具备伏击流行病学真理真理的内容也应进行详备商榷和纪录。
(四)密切战斗者走访及判定。对病例传染期的举止情况和东说念主群战斗情况进行跟踪和排查后,判定其密切战斗者。密切战斗者判定和连接按照《猴痘密切战斗者判定和连接指南》(附件4)实践。
详见附件3-1《猴痘病例个案走访表》。
四、组织与实施
按照“属地化连接”原则,由病例现住址所在的县(市、区)级疾控部门组织辖区疾控机构开展猴痘病例的流行病学走访,就诊医疗机构提供诊疗信息。走访单元应凭证走访计较和走访目标,确定走访东说念主员构成和职责单干,实时开展病例流行病学个案走访。走访过程中阐述多部门联防联控的协同作用,尽可能获取全面准确的流调信息。走访期间,走访东说念主员要作念好个东说念主防护。
五、信息的上报与分析
疾控机构完成走访后,应作念好病例分析回首,实时将流行病学个案走访表、走访讲述等贵府逐级报奉上司疾控机构,并作念好走访贵府的督察和归档。病例流调信息要按关联规定,严格作念好信息安全和个东说念主秘籍信息保护。
附件:3-1.猴痘病例个案走访表
附件4
猴痘密切战斗者判定和连接指南
为指导各地作念好猴痘密切战斗者判定和连接,灵验放浪猴痘疫情的传播,制定本指南。
一、密切战斗者判定圭臬
密切战斗者是指径直战斗病例的病变部位相称被沾秽物品,或感染动物相称分泌物、渗出物等沾秽物的东说念主员;以及事业表示或万古间近距离吸入病例呼吸说念飞沫等,经评估有感染风险的东说念主员。具体情形包括:
1.与疑似病例或确诊病例发病后有皮肤或黏膜径直战斗的东说念主员,战斗方式包括性战斗、抚摸、拥抱和亲吻等;
2.与有皮疹症状的疑似病例或确诊病例共用衣物、被褥、餐具等物品的东说念主员;
3.医疗诊疗、采样或实验室检测等操作过程中可能表示于病毒,经评估有感染风险的医疗卫生使命主说念主员;
4.与疑似病例或确诊病例发病前4天内有性战斗,并经流行病学走访专科东说念主员评估有感染风险的东说念主员,亦可判定为密切战斗者;
5.在局促密闭空间与疑似病例或确诊病例万古间近距离战斗(如万古间共处团结禁闭空间),经流行病学走访专科东说念主员评估有感染风险的东说念主员,亦可判定为密切战斗者;
6.战斗感染猴痘病毒的动物相称分泌物、渗出物等沾秽物,而未遴选灵验个东说念主防护的东说念主员;
7.其他可能存在病毒表示风险的东说念主员。
二、密切战斗者连接
1.连接期限与方式。病例发现地疾控机构或密切战斗者所在地疾控机构应于跟踪到密切战斗者今日实时开展猴痘病毒核酸检测,呈报并指导密切战斗者作念好自我健康监测,健康监测期限为自最后密切战斗之日算起21天。自我健康监测期间可平淡生活与使命,需幸免与他东说念主发素性战斗等密切战斗,幸免捐献血液等。
2.知情呈报。实施健康监测时,疾控机构或下层医疗卫盼望构应理论呈报健康监测的起因、期限、留苦衷项和疾病联系学问,以及负责随访疾控机构或下层医疗卫盼望构接头东说念主和接头方式,并披发《猴痘密切战斗者健康呈报书》。
3.按时随访。疾控机构或下层医疗卫盼望构应在第7、14、21天电话或上门主动商榷密切战斗者自我健康监测情况,提供顾问指导建议。发现颠倒情况,实时走访惩处。
4.自我健康监测。对持每天作念好体温测量和症状监测,主要症状包括发烧(>37.3℃)、皮疹、浅表淋谄媚肿大等。密切战斗者一朝出现联系症状应实时赶赴医疗机构就诊或与随访接头东说念主取得接头,收受猴痘病毒核酸检测。
附件:4-1.猴痘密切战斗者健康呈报书
附件5
猴痘消毒手艺指南
为进一步模范猴痘疫情联系的消毒使命,落实科学消毒、精确消毒,减少猴痘病毒对公众健康形成的危害,制定本指南。
一、疫源地消毒
(一)适用界限。
适用于出现猴痘病例后,对其可能沾污的风物和物品进行的随时消毒和临了消毒。
(二)消毒原则。
1.界限和对象确定。
凭证流行病学走访效用,确定现场消毒的界限和对象。对病例在入院、转运期间可能沾污的环境和物品,进行随时消毒。对病例居住或举止过的风物,如居住风物、使命风物、学习风物、诊疗风物、转运器用,相称他可能受到沾污的风物,在其离开后(如入院、转院、出院、死亡)进行临了消毒。
2.方法选拔。
(1)诊疗用品消毒。尽量选拔一次性诊疗用品,非一次性诊疗用品应首选压力蒸汽灭菌,不耐热物品可选拔化学消毒剂或低温灭菌开发进行消毒或灭菌。
(2)手消毒。建议使用手消毒剂揉搓双手进行消毒,也可选拔75%酒精、过氧化氢等消毒剂。
(3)环境和物体名义消毒。可选拔含氯消毒剂、二氧化氯、过氧乙酸、过氧化氢等消毒剂擦抹、喷洒或浸泡消毒。
(4)衣物、床单等纺织品消毒。可选拔热力消毒、含氯消毒剂或季铵盐类消毒剂浸泡等消毒方式。
(三)常见沾污对象的消毒方法。
1.手消毒。
可选用速干手消毒剂,或径直选用75%酒精进行擦抹消毒;醇类过敏者,可选拔季铵盐类等灵验的非醇类手消毒剂。有肉眼可见沾秽物时,应先使用洗手液(或肥皂)在流动水下按照六步洗手法清洗双手,然后按上述方法消毒。
2.皮肤、黏膜。
皮肤被沾秽物沾污时,应立即捣毁沾秽物,再用一次性吸水材料沾取0.5%碘伏或过氧化氢消毒剂擦抹消毒3分钟以上,使用净水清洗干净;粘膜应用深广生理盐水冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒。
米菲兔 足交3.床单、毛巾、一稔等纺织品。
病例使用的床单、毛巾、一稔等纺织品,无肉眼可见沾秽物时,若需重叠使用,可用畅达蒸汽或煮沸消毒30分钟;或用灵验氯500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消毒剂浸泡30分钟后,按照老例清洗;或用其他灵验的消毒方法。不耐湿的衣物可选用环氧乙烷或干热方法进行消毒处理。
有分泌物、渗出液、排泄物、血液、体液等沾秽物时,建议按医疗废料聚合处理。
4.餐(饮)具。
病例所使用的碗、盘、筷、杯等餐(饮)具捣毁食品残渣后,煮沸消毒30分钟,或使用灵验氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后,再用净水洗净。
5.沾秽物。
对病例分泌物、渗出液、排泄物、血液、体液等小数沾秽物可用一次性吸水材料(如纱布、抹布等)沾取灵验氯5000-10000mg/L的含氯消毒剂(或能达到高水平消毒的消毒湿巾/干巾)小心移除。
对病例分泌物、渗出液、排泄物、血液、体液等深广沾秽物应使用含吸水因素的消毒粉或漂白粉皆备障翳,或用一次性吸水材料皆备障翳后用足量的灵验氯5000-10000mg/L的含氯消毒剂浇在吸水材料上,作用30分钟以上(或能达到高水平消毒的消毒干巾),小心捣毁干净。捣毁过程中幸免战斗沾秽物,清算的沾秽物按医疗废料聚合惩处。
病例的分泌物等应有有益容器积累,用灵验氯20000mg/L的含氯消毒剂,按物、药比例1:2浸泡消毒2小时。
捣毁沾秽物后,卤莽沾污的环境和物体名义进行消毒。盛放沾秽物的容器可用灵验氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液浸泡消毒30分钟,然后清洗干净。
6.大地、墙壁。
有肉眼可见沾秽物时,应先皆备捣毁沾秽物再消毒。无肉眼可见沾秽物时,可用灵验氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂擦抹或喷洒消毒;不耐腐蚀的大地和墙壁,也可用2000mg/L的季铵盐类消毒剂喷洒或擦抹;消毒作用时代不少于30分钟。
7.物体名义。
诊疗设施开发名义以及床围栏、床头柜、产品、门把手、卫生洁具和家居用品等有肉眼可见沾秽物时,应先皆备捣毁沾秽物再消毒。无肉眼可见沾秽物时,用灵验氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂,不耐腐蚀的物体名义也可用2000mg/L的季铵盐类消毒剂进行喷洒、擦抹或浸泡消毒,作用30分钟后净水擦抹干净。
8.浑水和粪便。
在过问市政排水管网前需进行消毒处理,消毒后浑水应当顺应《医疗机构水沾秽物排放圭臬》(GB18466-2005)。
9.病例生活垃圾。
病例生活垃圾按医疗废料处理。
10.医疗废料。
医疗废料的惩处应礼服《医疗废料连接条例》和《医疗卫盼望构医疗废料连接见地》的要求,模范使用双层黄色医疗废料积累袋封装后,按老例历程进行惩处。
11.室内空气。
如经科学评估,需对室内空气进行消毒,则在冷凌弃面况下,可选拔5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢、二氧化氯(浓度按产品讲明书)等消毒剂,按20mL/m³用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒。也可遴选训诲证安全灵验的其他消毒方法。
二、留苦衷项
现场消毒应确保所用消毒产品正当灵验,所选消毒方法科学可行。现场消毒时,凭证现场情况和联系圭臬要求,选拔及格灵验的个东说念主防护装备,在作念好个东说念主防护的前提下,严格按照使命决议实施消毒。
消毒实施单元应具备现场消毒能力,操作主说念主员应经过消毒专科培训,掌捏消毒和个东说念主防护基本学问,熟练消毒器械的使用和消毒剂的配制等。
每次开展消毒使命时均应作念好消毒纪录,包括消毒对象、消毒面积(体积)、消毒剂浓度(或消毒器械强度)、剂量、作用时代等。同期,联系部门和单元应作念好消毒使命的监督连接和评价。
附件6
猴痘个东说念主防护指南
为加强公众、疫情惩处联系使命主说念主员和医务东说念主员的个东说念主防护,幸免猴痘病毒表示感染,制定本指南。
一、居家圮绝赞助的病例等联系东说念主员
(一)适用界限。
适用于居家圮绝赞助的病例(疑似病例和确诊病例)、照护东说念主员或共同居住者的个东说念主防护。
(二)居家圮绝区域要求。
1.应选拔有当然透风、孤立卫生间的房间作为圮绝区域。
2.应配备专用的餐具,床单、毛巾等床上用品,消毒剂和口罩等个东说念主防护用品,电视和平板电脑等电子开发。
3.卫生间宜配备专用的洗衣机,地漏应有水封。
(三)病例连接要求。
1.应大要进行自我照护。
2.应每天作念好体温测量和症状监测,幸免与他东说念主共用个东说念主物品。
3.幸免与他东说念主发素性战斗,幸免与免疫力低下东说念主员、儿童、老东说念主、妊妇相称他东说念主员的径直战斗,幸免与宠物等动物战斗,幸免捐献血液等。
4.出门就诊时,应率领医用外科口罩,着长衣长裤,确保遮住扫数损害皮肤,幸免与他东说念主密切战斗,幸免乘坐各人交通器用。
(四)照护东说念主员要求。
1.应每天作念好体温测量和症状监测。
2.应尽量幸免过问圮绝区域。如需过问圮绝区域,应率领医用外科口罩和一次性手套,与病例保持至少1米的距离。在离开圮绝区域之后,应加强手卫生,并对脱下的口罩和手套进行消毒处理后烧毁。
3.在拿放和清洗居家圮绝赞助病例的床单、一稔和处理垃圾的过程中,应幸免抖动。用湿拖布拖地,幸免干扫。用湿抹布清洁家居用品名义,地毯应用蒸汽清洗,幸免使用吸尘器。
4.应将居家圮绝赞助病例的餐具、床单、毛巾和衣物单独洗涤和消毒,可选拔热力消毒、含氯消毒剂或季铵盐类消毒剂浸泡等消毒方式。
(五)救急惩处。
1.照护东说念主员或共同居住者出现任何症状或不适推崇,应当实时赶赴指定医疗机构就诊并主动讲述可疑战斗史。
2.对其战斗的物品、举止的区域等取悦风险评估效用进行消毒处理。
二、疫情惩处联系使命主说念主员
(一)适用界限。
适用于猴痘疫情期间流行病学走访、环境清洁消毒东说念主员的个东说念主防护。
(二)流行病学走访东说念主员防护要求。
1.个东说念主防护装备。一次性乳胶手套、医用外科口罩、一次性圮绝衣等。
2.个东说念主防护要求。模范率领口罩,加强手卫生,与被走访东说念主员保持至少1米的距离。
3.废料连接。走访驱散后,烧毁的个东说念主防护装备暂存、处理和惩处应按照《医疗废料连接条例》实践。
4.救急惩处。如在走访过程中出现口罩零碎、径直战斗了病例皮肤或分泌物等情况,要取悦被走访东说念主员的临床会诊效用、空间的密闭性、战斗的时代和距离等进行风险评估,取悦风险评估效用,遴选相应的惩处措施。
(三)环境清洁消毒东说念主员防护要求。
1.个东说念主防护装备。一次性乳胶手套、医用外科口罩、一次性圮绝衣、防水靴套等。
2.个东说念主防护要求。模范率领口罩,加强手卫生,尽量减少与被消毒物品的径直战斗。
3.废料连接。清洁消毒驱散后,烧毁的个东说念主防护装备暂存、处理和惩处应按照《医疗废料连接条例》实践。
4.救急惩处。如在清洁消毒过程中出现口罩零碎、皮肤损害或径直战斗排泄物、血液等情况,要取悦被清洁消毒物品的类型、战斗的时代和空间的密闭性等进行风险评估,取悦风险评估效用,遴选相应的惩处措施。
三、医务东说念主员的个东说念主防护
(一)适用界限。
适用于猴痘疫情期间医务东说念主员相称使命环境的防护。
(二)基本要求。
1.个东说念主防护装备要求。医务东说念主员实践圭臬驻防,遴选经战斗传播和经飞沫传播疾病的圮绝与驻防措施,率领一次性乳胶手套、KN95/N95及以上司别的口罩、防护面屏或护目镜、一次性圮绝衣等。
2.环境防护要求。病院环境的清洁消毒应顺应附件5的要求。应幸免干除尘、清扫或吸尘等举止。首选湿式清洁方法。
3.废料连接。个东说念主防护装备、病例敷料等暂存、处理和惩处应按照《医疗废料连接条例》实践。
附件7
猴痘病毒实验室检测手艺指南
为指导各级疾控部门和其他联系机构模范开展猴痘病毒实验室检测使命,快速、准确识别猴痘确诊病例,制定本指南。本指南主要先容标本采集以及猴痘病毒核酸荧光定量PCR检测方法、生物安全要求等内容。
一、检测对象
(一)猴痘确诊病例和疑似病例;
(二)密切战斗者;
(三)感染或疑似感染猴痘病毒的动物;
(四)环境或其它生物材料。
二、手艺东说念主员基本要求
(一)采样东说念主员。从事猴痘病毒核酸检测标本采集的手艺东说念主员应当经过生物安全培训,培训及格后方可从事采样使命。采样东说念主员应熟练采集标本种类和采集方法,熟练掌捏标本采集操作历程及留苦衷项,作念好标本信息纪录,确保标本质料顺应要求、标本及联系信息可追忆。
1.采样东说念主员个东说念主防护装备要求:KN95/N95及以上司别的口罩、防护面屏或护目镜、一次性圮绝衣、一次性乳胶手套(尽可能戴两层)、靴套;淌若战斗了病例血液、体液、分泌物或排泄物,应实时更换手套。浑水采样东说念主员可凭证践诺使命需要,顺应镌汰防护级别。
2.入院病例的标本由所在病院医护东说念主员采集,凭阐述验室检测使命的需要,可取悦病程屡次采样。
3.密切战斗者标本由当地疾控机构或医疗机构专科东说念主员采集。
4.感染或疑似感染猴痘病毒的动物由当地疾控机构融合遣物疫控部门专科采样东说念主员负责采集。
5.环境或其它生物材料标本由联系专科采样东说念主员负责采集。
(二)检测东说念主员。实验室检测手艺东说念主员应具备联系专科大专以上学历或具有中级及以上专科手艺经验,并有2年以上实验室使命经历,收受过核酸检测联系培训,培训及格后方可从事检测使命。实验室配备的使命主说念主员数目应与所开展检测神态及标本量相妥当,确保大要实时、熟练、准确地开展实验室检测和讲述效用。
三、标本采集、保存和输送
(一)标本采集种类。
1.首选标本是皮肤(黏膜)病变部位标本,包括病变名义拭子、痘疱液或痘疱渗出物拭子、痘痂或痘痂拭子等。
2.呼吸说念标本,如口咽拭子,可用于病例急性期检测,亦然密切战斗者检测最常用标本。
3.发病急性期可采集EDTA抗凝血标本进行核酸检测。
4.采集发病后7天内(急性期)、3-4周后(复原期)双份血清用于抗体检测。
5.直肠拭子、尿液、精液、唾液等其它标本仅用于计议,凭证使命需要采集。
6.浑水或其它环境生物材料标本凭证践诺使命需要进行采集。
(二)标本采集要求。
采集皮肤(黏膜)病变部位标本时应使用无菌聚酯纤维、尼龙或一样材质拭子,幸免使用棉拭子。采集疑似病例的标本前应幸免使用75%酒精等消毒剂清洁病变部位。每种类型的皮肤(黏膜)病变应尽可能采集两个以上拭子,每个病例应同期采集体格不同部位或外不雅不同的2-3种病变标本。采集皮肤(黏膜)病变部位标本时应顺应使劲。皮肤(黏膜)病变部位、痘痂或分泌物等不同拭子标本应甩掉于不同的采样管中。进行病毒分离时应采集干拭子标本(无采样液)或以非灭活型病毒采样液保存。凭阐述验室举止天禀确定使用非灭活型或灭活型采样液采集标本。
(三)标本采集方法。
1.斑疹、丘疹、水疱或脓疱等皮肤(黏膜)病变部位标本:一手紧捏采样拭子尾部,手与拭子头部保持一寸以上距离。采样时顺应使劲下压拭子,在皮损名义往还擦抹至少2-3次,然后以拭子另一面再重叠擦抹2-3次。淌若在擦抹过程中痘疱翻脸,要确保采集到痘疱液。采样后将拭子甩掉于无菌采样管中(可含病毒采样液或不含液体),撅断拭子头,去除拭子尾部,盖上管盖,以消毒纸巾擦抹消毒采样管,以封口膜密封管盖后将采样管保存或送检。
2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本:采样前应确保实验室可检测此类标本。使用无菌镊子或其他钝头器械夹取全部痘痂或面积至少4mm×4mm大小的结痂,甩掉于干燥、无菌的采样管中,采样完成后以创可贴障翳患处。
3.口咽拭子标本:被采集东说念主员头部微仰,嘴张大,表示两侧扁桃体,将拭子卓越舌根,在被采集者两侧扁桃体略微使劲往还擦抹至少3次,然后再在咽后壁高下擦抹至少3次,将拭子头浸入含2-3mL病毒保存液的管中或置于不含液体(干拭子)的无菌管中,尾部弃去,旋紧管盖。
4.血液标本:尽量采集急性期(发病7天内)的血液标本,建议使用含EDTA抗凝剂的真空采血管采集5mL全血,可利用全血进行检测,或室温静置30分钟后,1500-2000rpm离心10分钟,积累血浆于无菌管中进行检测。
5.血清标本:用真空负压采血管采集血液标本5mL,室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,积累血清于无菌螺口塑料管中。第一份血清应尽早(最佳在发病后7天内)釆集,第二份血清应在发病后第3-4周采集,采集血液标本5mL后室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,积累血清于无菌螺口塑料管中,用于猴痘抗体检测。
6.其他标本:依据缱绻需求模范采集。
(四)标本保存。
标本应在积累后1小时内冷藏(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下),并尽快进行检测。可在1周内检测的标本可置于4℃环境中保存;1周内无法检测的标本,短期可置于-20℃环境中保存,永久应置于-70℃或以下环境中保存。全血分离血浆前冷藏(2-8℃),分离出的血浆置于-20℃或以下环境中保存。应缔造专库或专柜单独保存标本,幸免反复冻融标本。
猴痘病毒相称联系标本应由专东说念把握理,准确纪录病毒及标本的开端、编号、数目等信息,具体要求可参考《病原微生物菌(毒)种储藏数据描写通则》(T/CPMA 011-2020)。应遴选灵验措施确保病毒及标本安全,防范发生误用、坏心使用、被盗、被抢、丢失、表示等事件。
(五)标本送检。
标本采集后应尽快在低温条目下(冰袋或干冰)送往实验室,如需远程输送标本,应遴选干冰冷冻输送方式进行储藏。
1.送检标本:病例标本先由省级及以下疾控机构进行初步检测,各省首例猴痘阳性标本应送中国疾控中心病毒病所复核。每个阳性病例至少采集一套标本(皮肤或黏膜病变部位标本、口咽拭子标本及急性期、复原期双份血清标本)送中国疾控中心病毒病所检测。各省级疾控机构凭证践诺情况制定省内样本送检、复核历程。
2.病原体及标本输送:
(1)国内输送。猴痘病毒或其他潜在感染性生物材料的输送包装分类属于A类,对应的衔接国编号为UN2814,包装顺应外洋民航组织文献Doc9284《危境品航空安全输送手艺笃定》的PI602分类包装要求,通过其他交通器用输送的可参照以上圭臬包装。猴痘病毒或其他潜在感染性材料输送应按照《可感染东说念主类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本输送连接规定》(原卫生部令第45号)办理《准运文凭》。浑水等环境标本暂按普通生物样本输送圭臬实践。
(2)外洋输送。猴痘毒株或样本在外洋间输送的,应模范包装,按照《进出境稀奇物品卫生检疫连接规定》办理联系手续,并满足联系国度和外洋联系要求。
四、猴痘病毒核酸检测要求及历程
(一)实验室天禀要求。
开展猴痘病毒核酸检测的实验室,应当顺应《病原微生物实验室生物安全连接条例》(国务院令第424号)或《医疗机构临床基因扩增素养实验室连接见地》(卫办医政发〔2010〕194号)关联规定,具备设区的市级卫生健康部门备案的生物安全二级(BSL-2)实验室及以上实验室条目,并备案猴痘病毒联系实验举止。孤立成就的医学素养实验室还应顺应《医学素养实验室基本圭臬(试行)》《医学素养实验室连接模范(试行)》等要求。
开展猴痘病毒分离、培养、中庸等触及病毒扩增、使用等实验操作的实验室应具备国度卫生健康委批准的生物安全三级(BSL-3)实验室及以上实验室条目,且获取猴痘病毒实验举止批准。分离的猴痘病毒应送国度病原微生物储藏中心/国度病原微生物质源库病毒分库储藏。
(二)实验室生物安全要求。
凭证2006年公布实施的《东说念主间传染的病原微生物名录》(简称《名录》),猴痘病毒生物危害分类为第一类,是一种高致病性病毒。按照《名录》要求,猴痘病毒的分离、培养等触及病毒扩增及使用的实验操作需在BSL-3及以上实验室的生物安全柜内进行;非灭活采样液采集的猴痘病例样本的灭活在BSL-3实验室进行;样本灭活后猴痘病毒DNA索求、检测可在BSL-2及以上实验室或PCR检测的有益区域或房间进行。如《名录》更新,开展猴痘病毒操作的实验室生物安全要求应按最新《名录》实践。浑水样本的灭活参照普通生物样本。
(三)实验室分区要求。
原则上开展猴痘病毒核酸检测的实验室应当成就以下区域:试剂储存和准备区、标本制备区、扩增和产物分析区。三个区域在物理空间上应皆备相互孤立,空气应定向畅达。各区功能永别是:
1.试剂储存和准备区:贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增响应夹杂液的制备,以及离心管、吸头等耗尽品的贮存和准备。
2.标本制备区:转运桶开启、标本灭活,核酸索求及加入至扩增响应管等。
3.扩增和产物分析区:核酸扩增和产物分析。
凭证使用仪器的功能,区域可顺应合并。如遴选标本处理、核酸索求及扩增检测为一体的自动化分析仪,标本制备区、扩增和产物分析区可合并。
(四)主要仪器开发。
实验室应当配备与开展素养神态相妥当的仪器开发,包括:二级生物安全柜、高速台式离情绪、干浴恒温器、荧光定量PCR仪、计时器、移液器。
(五)实验室猴痘病毒核酸检测历程。
实验室接到标本后,按照圭臬操作步履进行试剂准备、标本前处理、核酸索求、核酸扩增、效用分析及讲述。实验室应当建立可疑标本和阳性标本复检历程。
1.试剂与材料。
(1)标本:包括病变名义拭子、痘疱液或痘疱渗出液拭子、痘痂或痘痂拭子、咽拭子、全血或血浆等标本。
(2)核酸索求试剂盒(基因组DNA索求试剂盒):组织基因组DNA索求试剂盒或血液/细胞/组织基因组DNA索求试剂盒。
(3)核酸检测试剂:
①试剂:DNA团员酶或预混的PCR响应考剂(PCR Master Mix)。
②猴痘病毒检测引物、探针:
③阳性对照:涵盖检测靶标序列的质粒。
(4)灭菌去离子水、无水酒精
(5)消毒液
①75%酒精:用于手部和物体名义老例消毒,开启后灵验期为1周。
②含氯消毒液:现用现配,含灵验氯1000mg/L的消毒液用于物体名义老例消毒,含灵验氯5000mg/L的消毒液用于感染性材料溢洒时的救急处理。
(6)耗材:包括带滤芯的吸头、螺旋口的离心管、非螺旋口的离心管、含锆珠的打破管、PCR响应板和透明封膜或PCR响应管和透明盖。
(7)BSL-2个东说念主防护用品:包括KN95/N95口罩及以上司别的口罩、一次性圮绝衣、防护眼罩或面屏、一次性帽子、鞋套、靴套和手套。
2.实验前的标本接管。
(1)查对被检标本编号、姓名、性别、年岁及检测神态;
(2)待检标本的气象如有颠倒,需注明;
(3)待检标本永久存放在-70℃,短期存放可在-20℃,幸免反复冻融。
3.核酸检测操作步履及留苦衷项。
(1)病毒核酸(DNA)的制备
操作方法按DNA索求试剂盒相应讲明书进行操作,具体如下:
①索求试剂准备:第一次开启试剂盒,在使用前先在漂洗液中加入无水酒精,加入体积参照瓶上标签。扫数试剂在使用前应均衡至室温;扫数离心步履应在室温下进行。
②处理样本:
A.痘疱液:干拭子标本需以顺应体积的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。取100μL样本,加入80μL缓冲液,总量为180μL;标实质积不及100μL时用缓冲液补足总体积至180μL;
B.病变皮疹或痘痂:取1块结痂按质料/体积(1mg/50μL)加入相应体积含PS的PBS,研磨或匀浆处理,取80μL,然后加入100μL缓冲液;
C.咽拭子、其它拭子:从采样液中取200μL标本,干拭子标本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬,混匀后取200μL;
D.全血或血清:径直取200μL标本。
③加入20μL卵白酶K溶液,混匀,溶液会变廓清。若样本为病变皮疹或其它组织时,加入卵白酶K混匀后,在56℃甩掉,直至组织溶化,再进行下一步履。
④加入200μL裂解缓冲液,充分混匀,70℃甩掉10分钟,或至溶液变廓清,省略离心以去除管盖内壁水珠。
需留心:加入裂解缓冲液后可能会出现白色絮状千里淀,在70℃甩掉后会消失。如溶液未变廓清,讲明细胞裂解不澈底,可能导致索求DNA量少或索求出的DNA不纯。
⑤加200μL无水酒精,充分混匀,此时可能会出现絮状千里淀,省略离心以去除管盖内壁水珠。
⑥将上一步履所得溶液和絮状千里淀均加至吸附柱中(吸附柱放入废液积累管中),8000rpm离心1分钟,弃废液。
⑦加入500μL漂洗缓冲液1(使用前先搜检是否已加入无水酒精),8000rpm离心1分钟,弃废液。
⑧加入500μL 漂洗缓冲液2(使用前先搜检是否已加入无水酒精),最大转速13000rpm离心3min,弃废液。
⑨将吸附柱放回废液积累管中,最大转速13000rpm离心1分钟,尽量去除漂洗液。
⑩将吸附柱转入一根干净的离心管中(需自行准备,试剂盒中未提供),加入50μL洗脱缓冲液或灭菌去离子水,室温甩掉2-5分钟,8000rpm离心1分钟。积累滤出液,作念好标记,4℃或-20℃(短期)保存备用,-70℃永久保存。
(2)核酸检测:实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病毒核酸(PCR实验室进行)。
①响应体系的准备:每孔20μL,加入5μL样本DNA,合计25μL;每次PCR响应,除检测标本外,应加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照;扫数样本,包括对照,应设复孔。
②加样: 每根响应管中加入核酸或对照各5uL,盖紧管盖或封好透明膜,置于荧光定量PCR检测仪上。
③扩增条目设定:
④仪器检测通说念选拔:使用荧光定量PCR检测仪,选拔Fam荧光信号检测通说念,积累设在60℃。具体成就方法参照各仪器使用讲明书。
⑤效用分析阈值设定:使用荧光定量PCR检测仪进行效用分析时,基线取3-10或6-15个轮回的荧光信号,阈值设定原则为阈值线刚好卓越平淡阴性对照扩增弧线最高点,也可凭证仪器杂音情况调整阈值。
(3)核酸检测效用判断
①Real-time PCR响应系统的质料放浪:响应效用应同期顺应以下2个条目,不然试验效用无效,应再行开展检测。阴性对照无扩增,为阴性。阳性对照未出现阴性效用。
②效用判定:
A.阴性:双孔Ct值>37,或无Ct值;
B.灰区:一孔Ct值>37;
C.阳性:双孔Ct值<37。
扫数阳性和处于灰区的标本应重叠检测或经序列分析进行确诊。需留心:当标本仅为咽拭子或血清、血浆,且检测效用为阴性时,应取悦临床症状,矜重作念出阴性会诊。
(4)表格纪录
作念好荧光定量实时PCR方法检测猴痘病毒核酸原始纪录。
五、猴痘病毒全基因组测序
1.测序标本选取原则。原土疫情中的首发或早期病例、与早期病例有流行病学关联的要津病例、感染开端不解的原土病例、境外输入病例阳性标本等。以上标本在核酸荧光定量PCR检测Ct值≤32时进行测序(要津样本之外)。
2.测序要求。以省为单元确定开展猴痘病毒全基因组测序的机构。建议使用扩增子手艺进行猴痘病毒全基因组测序。测序数据经质控及格后方可用于后续生物信息分析。二代测序平台障翳深度应不低于10×,三代测序平台障翳深度应不低于50×,全基因组测序障翳度应不低于98%。数据比对分析推选参考猴痘基因组NC_063383.1。
各省应建立本省输入、原土病例猴痘病毒基因组数据库,应具备序列对比分析能力。具备测序条目的省份要在接管标本后48小时内开展测序使命,要津样本要务实验室收到标本后1周内提供测序效用讲述,扫数测序原始数据(一般为fastq理论)、拼装序列(一般为fasta理论)和标本序列测定效用讲述单(见附件7-2)应在获取序列48小时内报送中国疾控中心病毒病所进行序列汇总、分析。病毒病所应将序列分析效用实时反馈各省,并将寰宇猴痘病毒序列汇总、分析效用实时上报国度疾控局。
3.分子分型。推选使用在线分析器用Nextclade(https:// clades.nextstrain.org)对变异株进行分子分型。
附件:
7-1猴痘病毒检测标本送检表
7-2猴痘病毒标本序列测定效用讲述单
转自 国度疾病驻防放浪局激情综合网